海南上溪省級自然保護區于1981年經原海南行政區公署([1981]151號)文批準成立,1990年經原萬寧縣人民政府劃界確權。保護區位于萬寧市西南部,東經110°02′29″~110°14′17″,北緯18°45′36″~19°00′49″,分布在萬寧市三更羅鎮、長豐鎮及興隆華僑農場、新中農場行政區域內,其東鄰本市長豐鎮;西與瓊中縣交界;南至南林省級自然保護區;北至瓊海市牛路嶺水庫和海南尖嶺省自然保護區,總面積11663hm2。
保護區總體屬于低山—高丘陵地貌。區內最高海拔山峰為900米,其余山峰海拔一般在350米—700米之間,為海南島森林生態系統類型自然保護區中的低海拔類型,區內保存了為數不多的熱帶低地雨林和季雨林樹種。
保護區的土壤類型主要為磚紅壤。土層深厚,大多數厚于80厘米,土壤顯酸性至微酸性。土壤自然植被主要為低地次生雨林、灌叢和草坡。
保護區屬于熱帶海洋季風氣候,干濕季節分明,5-10月為雨季,11月—次年4月為旱季。區內年平均氣溫25℃左右,年均降雨量為2077.4毫米,年均蒸發量為1770毫米,年平均相對濕度77%,臺風、暴雨、干旱、低溫陰雨等是保護區的主要災害性天氣。
保護區植被分為熱帶山地雨林、熱帶濕潤雨林、熱帶次生林、灌叢和人工林等5個植被類型。區內有野生種子植物151科619屬1178種(含變種、亞種及變型),其中裸子植物6科、7屬、13種,雙子葉植物124科、507屬、986種,單子葉植物21科、105屬、179種。有22種被列入《國家重點保護植物名錄》。其中國家I級保護植物——海南蘇鐵在局部地區可形成優勢種。
保護區大體可分為熱帶溝谷雨林動物群、熱帶山地雨林動物群、山地次生灌木草坡動物群、農田動物群等4個動物群。根據文獻記載和近年來的調查,上溪地區記錄的陸棲脊椎動物有27目76科232種。其中兩棲綱2目6科22種,爬行綱3目11科39種,鳥綱14目38科128種,哺乳綱8目21科43種。
保護區管理機構為海南上溪省級自然保護區管理站,屬納入省財政撥款的正科級事業管理單位,下設新中、香根、石福、大洲等4個護林分站。